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草鱼垂体生长激素分离纯化及其抗体制备的研究 总被引:11,自引:3,他引:8
应用碱性抽提,亲和层析,凝胶过滤和离子交换层析等技术从草鱼垂体中分离提纯出纯度高的草鱼生长激素(gcGH)用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测表明草鱼GH与大马哈鱼GH抗血清具有明显的免疫交叉反应,而与大马哈鱼催乳素(PRL)抗血清没有交叉反应,聚丙烯酰胺凝胶电泳表明草鱼GH为单一蛋白带,其分子量约为22500道尔顿,等电聚焦揭示出草鱼GH主要由等电点为4.7和5.0的两条蛋白带组成,用纯化的草 相似文献
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草鱼生长激素非竞争式酶联免疫吸附测定法的建立及鉴定 总被引:9,自引:0,他引:9
应用草鱼生长激素(gcGH)单克隆抗体及多价兔抗血清建立了草鱼GH非竞争式酶’联免疫吸附测定ELISA系统。用正辛酸法对腹水单抗进行了分离纯化,获得了高纯度的单抗制备物。聚丙烯酸胺凝胶电泳表明纯化的单抗由分子量分别为55kD和25kD的两条蛋白带组成。用纯化单抗铺底,用兔抗血清作后续抗体建立了一种测定草鱼GH的非竞争式双抗夹心ELISA方法。交叉试验表明该测定系统只与草鱼GH和基因重组鲤生长激素(rcGH)具有剂量依存的结合反应,而与大马哈鱼生长激素(sGH)、牛生长激素(bGH)、大马哈鱼促性腺激素(sGtH)、及黑鲢促性腺激素(bscGtH)等均无交叉反应。该 ELISA方法的灵敏度可达0.8ng/ml,组内变异系数为 5.9 %,组间变异系数为7.6%,回收率达90%以上。初步应用表明,鲤和团头鲂垂体抽提液、草鱼血清、鲤血清及鲫血清在该测定系统中有剂量依存的反应曲线,而大口鲶、黄颡鱼、中华鲟及黄鳝鱼垂体抽提液及大口鲶、胡子鲶和罗非鱼血清在该测定系统中没有交叉反应。 相似文献
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